-
氯化钙法进行质粒转化
利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形。仪器用具:37℃培养箱;42℃水浴;冰浴实验步骤:0.1 M CaCl2置冰
氯化钙法 质粒转化 -
脂质体转染的几个实验方法
摘要: 本实验介绍了脂质体转染的几个方法。实验原理脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁
脂质体转染 -
关于细胞转染 你知道多少?
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可分为瞬时转染,稳定转染等瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细
-
转染实验的注意事项
将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包
-
细胞瞬时转染
原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基
-
大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法
摘要: 本文主要介绍了大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法.第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的 培养基 上,
-
重组质粒的转化、筛选和鉴定操作
摘要: 学习克隆工作中最常用的双酶切,将外源基因与质粒连接方法及操作技术.一、实验目的:1、学习克隆工作中最常用的双酶切;2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作
-
瞬时转染分析研究的步骤
1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究转录调控,最常用的方法是瞬时转染分析法。该方法是通过一定的转染程序将含目的调控区的质粒导人培养细胞。在典型情况
-
转染细胞的稳定筛选
1.确定抗生素作用的最佳浓度: 不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。① 提前 24 小时在 9
-
重组子的筛选和鉴定
PCR 鉴定重组子重组子可通过酶切进行鉴定,也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定,阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物。1. 用牙签挑
-
各种感受态细胞的区别、用途和特征
摘要: 本文主要介绍了各种感受态细胞的区别、用途和特征.Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1
-
你可能提过很多质粒 却不一定知道这些
经常提质粒吗?熟练之后,提质粒乃至质粒构建都很简单。但如果真问起一些质粒的细节,可能很多人回答不了。不信随我看看。质粒组成要素一个合格的质粒含有以下组成部分:复
-
大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
概 述在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一
-
基因转染实验(脂质体介导DNA转染法)
脂质体(lipofectin regeant,LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2,3-Dioleyoxy, Propyl]-n, n,n-Trimethyla
-
计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数
转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:转化子总数=菌落数稀释倍数转化反应原液总体积/涂板菌液体