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质粒DNA的限制性内切酶酶切分析
简介实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。相关基础知识限制性核酸内切酶
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简并寡核苷酸诱变实验(小段DNA序列中产生大量突变)
材料与仪器大肠杆菌DNA聚合酶 dNTP 甘油 NaCl EDTA SDS 无水乙醇水浴锅 离心机 分光光度计步骤1. 设计寡核苷酸,其3‘端含有由8个核苷酸
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用 T7 噬菌体 DNA 聚合酶进行双脱氧测序反应实验
材料与仪器去离子蒸馏水 二硫苏糖醇 dNTP 和 ddNTP 标记混合液和 ddNTP 延伸 终止混合液 甲酰胺上样缓冲液 测序酶稀释缓冲液 测序酶反应缓冲液含
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用 Taq DNA 聚合酶进行双脱氧测序反应实验
材料与仪器去离子蒸馏水 ddNTP dNTP 甲酰胺加样缓冲液。酶和缓冲液。Taq 酶或类似的热稳定 DNA 聚合酶 Taq 酶稀释缓冲液 核酸和寡核苷酸 寡核
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上样并进行 DNA 测序实验
材料与仪器缓冲液和溶液 0.5XTBE 和 或 1XTBE 凝胶 核酸和寡核苷酸自动微量加液器 牛头夹 凝胶温度监测条 巴斯德吸管 带塑料涂层的金属板 稳压电源
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放射自显影和从测序凝胶上读取 DNA 序列实验
材料与仪器步骤材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的配方见附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。凝胶固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性
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寡核苷酸指导的单链 DNA 诱变实验
材料与仪器适用于转化的大肠杆菌菌株 用于转化的大肠杆菌 TG1 感受态菌ATP PE1缓冲液 PE2 缓冲液 噬菌体 T4 DNA 连接酶 噬菌体 T4 多核苷
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以双链 DNA 为模板的体外诱变:用 DpnⅠ选择突变体实验
材料与仪器带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株ATP 含有四种 dNTF 的混合溶液 诱变缓沖液 NaOH NaAC TE 噬菌体 T4DNA 连接酶
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脂染介导的 DNA 转染实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞培养物脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠 质粒 DNA 纯化闭环质粒 DNA 细胞生长培养基试管 聚苯乙烯或聚丙烯试管 组织培养皿步骤
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磷酸钙介导的质粒 DNA 转染真核细胞实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞CaCl2 氯喹 Giemsa 染液 甘油 HEPES 盐缓冲液 甲醇 磷酸盐缓冲液 丁酸钠 TE 质粒 DNA 细胞生长培养基
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磷酸钙介导的高分子量基因组 DNA 转染细胞实验
材料与仪器指数生长的哺乳动物细胞培养物CaCl2 甘油 HEPES 盐缓冲液 异丙醇 NaCl 基因组 DNA 带有选择性标志的质粒 细胞生长培养基聚乙烯试管
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生物粒子介导的 DNA 转染实验
材料与仪器CaCl2 乙醇 甘油 亚精胺 质粒DNA 细胞生长培养基基因枪 金或钨粒子 镜头纸 微量离心管 需转染的细胞或组织步骤材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液
生物粒子 DNA 转染实验 -
λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验
原理对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可
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DNA 酶 I 足迹法对 DNA 上的蛋白质结合位点作图实验
材料与仪器新鲜组织、培养的细胞、来自细胞或组织的蛋白成分细胞匀浆缓冲液 细胞重悬缓冲液 细胞淋洗缓冲液 乙醇 Ficoll 400 甲酰胺染色液 MgCl2 C
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DNA 结合蛋白的凝胶阻滞分析实验
材料与仪器作为对照的核提取物或蛋白组分 核提取物或蛋白组分Ficoll 400 聚乙烯醇 蔗糖染色液 10X Tris-氨基乙酸或Tris-硼酸-EDTA(TB
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