PCR
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定点诱变实验(利用PCR引物点突变)
材料与仪器DNADNA聚合酶 klenow 限制性内切酶水浴锅 离心机 培养箱步骤1. 制备模板(见基本方案,步骤1和2) 2. 合成和纯化寡核苷酸引物并对
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循环测序:利用 PCR 和引物末端标记进行双脱氧测序实验
材料与仪器ddNTP 延伸 终止混合物 酶及其缓冲液 AmpliTaq CS 或其他无外切酶活性的 DNA 聚合酶 循环测序缓冲液 热稳定的 DNA 聚合酶 核
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利用大引物 PCR 在同一试管中进行高效快速定点诱变实验
材料与仪器扩增缓冲液 含有四种 dNTP 的混合溶液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 正向和反向内引物 诱变引物 模板 DNA带屏障装置的自
PCR -
通过PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点
原理材料与仪器噬菌体 T4 DNA 连接酶 限制性内切核酸酶 靶 DNA氯仿 EDTA 乙醇 酚 氯仿 乙酸钠 TE琼脂糖凝胶 水浴箱步骤一、材料1. 缓冲液与
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应用 PCR 的遗传工程
原理本方案(由德克萨斯大学西南医学中心的 Andereson 提供)叙述在克隆化的哺乳动物 cDNA 的 5‘ 与 3‘ 端同时导入限制性内切核
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利用PCR分析酵母菌落
原理用 PCR 分析酵母菌落时,无需纯化 DNA。本方案以单个酵母菌落的粗裂解液作为 PCR 扩增的模板,来确定酵母中是否携带目的 DNA 序列。 材料与仪器T
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长距离PCR
原理在标准 PCR 反应条件下,PCR 扩增 DNA 片段的长度一般为 1~2 kb,这种扩增能力对许许多多常规的 DNA 分子操作技术要求来说是已经足够了(如
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差异显示PCR
材料与仪器反转录酶 热稳定 DNA 聚合酶 锚定 3‘-寡核苷酸引物 随机 5‘-寡核苷酸引物 总 RNA 带放射标记的 dATP扩增缓冲液 D
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利用PCR进行单一位点的体外基因定点突变
简介利用 PCR 的引物设计灵活性.在扩增中直接引入突变。首先设计一对引物,引物l用于导入突变位点,引物 2 与引物 1 的 5‘-端邻接、3‘
PCR 基因定点突变 -
高 GC 含量片段的 PCR 扩增实验
材料与仪器甜菜碱 dNTP 溶液 二甲基亚砜 四甲基砜 Taq 酶和酶缓冲引物PCR 仪步骤一、材料1. 试剂甜菜碱(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四种
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以硅膜为基础纯化 PCR 产物实验方法
材料与仪器乙醇 PCR 样品真空装置 真空泵 真空废物收集装置 真空管 PCR 纯化系统步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇,80%(75 ml/板;使用前
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建立一个实时 PCR 定量分析实验
材料与仪器MgCl2 探针 HotStmMix 正向和反向扩增引物 模板 DNAPCR 仪 反应管、毛细管或 96 孔的微量滴定板步骤一、材料1. 缓冲液和溶液
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实时 PCR 实验
材料与仪器PCR Super Mix-UDG ROX 染料 蒸馏水 反向引物 正向引物ABIPRISM7700 型号系列检测系统步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和
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多重 PCR 扩增实验
原理多重PCR(multiplex PCR),其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于
PCR -
逆转录酶原位 PCR 实验
原理原位 PCR 仪,盖玻片,培养箱,湿盒,RT-PCR 试剂盒,Permount材料与仪器组织样品和细胞培养物Nuclear Fast Red 甲醛缓冲液 检
PCR