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全血RNA提取
原理红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离
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光活化的核苷酸类似物介导的RNA-蛋白的交联实验
原理光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线(254
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采用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA分子
原理因为哺乳动物细胞不具备低等真核生物细胞所具有的扩增 RNAi 信号的机制,因此人工合成或体外转录的 siRNA 分子在细胞内的作用是瞬时性的,不适合用于进行
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天然RNA文库筛选与蛋白特异性结合的RNA序列实验
原理细胞中,蛋白质与 RNA 结合参与多种生理调控和发育过程。在 mRNA 的加帽,多聚腺苷酸化,剪切,核外运,翻译起始及降解等过程中都存在着蛋白质与 RNA
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采用PACE分析RNA-肽相互作用实验
原理聚丙烯酰胺共电泳(poiyacrylamide coelectrophuresis,PACE ) 检测是相对较晚发展起来的定量分析蛋白质、肽与 DNA 或
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RNA足迹和修饰干扰分析实验
原理RNA 足迹和修饰干扰分析(RNA footprinting and modification interference analysis)是用来研究 RN
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硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA-蛋白质解离常数实验
原理利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以
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荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验
材料与仪器步骤##一、 从组织和培养细胞中分离RNA1.TRIzol试 剂(Invitrogen)。该试剂含有苯酚和硫氰酸盐化合物,操作时应穿实验服,戴手套,存
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16S RNA靶向变性梯度凝胶电泳指纹 图谱分析微生物菌群实验
材料与仪器步骤疏水面的水将滑落)。5.用滚筒固定胶贴后移去纸保护层。6.用纸巾轻轻吸干胶贴。7.用 9 6 % 乙醇清洗分隔条,并放于胶贴的左右两侧。8.将小玻
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用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取法纯化组织和细胞中的 RNA
原理在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏,RNA 受损的可能就大大降低,而纯化的过程就可以按合适的速度进行。材料与仪器
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核糖核酸酶保护(用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图)
原理核糖核酸酶保护分析用于度量特异性 mRNA 的丰度以及为它们的拓扑异构特征作图。这种方法包括测试 RNA 与互补的放射标记的 RNA 探针(核糖探针)杂交,
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用一步法从细胞和组织中同时制备DNA、RNA和蛋白质
原理同 Chomczynski 和 Sacchi 两人于 1987 年报道的 RNA 快速提取法一样,这种方法包括用含异硫氰酸胍和酚的一种单相液来裂解细胞。加入
DNA RNA 蛋白质 -
变性RNA在膜上的转移和固定
原理多数情况下,为检测特定的靶 mRNA,需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后,再从胶上转移到二维支持物上,(通常用尼龙膜),再与持异的标记探针杂交。正如在 N
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用S1核酸酶对RNA作图
原理三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5
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根据大小分离RNA:乙二醛化RNA的琼脂糖凝胶电泳
原理这个方法将乙二醛变性和琼脂糖凝胶电泳结合了起来(从 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而来)。
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