吖啶橙或溴化乙锭染色

细胞
染液
试管

1c)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，用手腕轻柔地混合。

2c)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。

3c)计数至少200个细胞，记录以下四个细胞状态的每一个数值：①有正常核的活细胞 (VN；有结构的亮绿色染色质）；②有凋亡核的活细胞（VA;高浓缩或碎片化的亮 绿染色质）；③正常核的死细胞（NVN;有结构的亮橙色染色质）；④有凋亡核的死细胞（NVA;高浓缩或碎片化的亮橙色染色质)。

溴化乙锭只能染死细胞。它插入DNA,使DNA呈现橙色；与RNA的结合很弱，呈现出微红色。因此死细胞有明亮橙色的染色质（溴化乙锭远超过吖啶橙），而且，它的细胞质如果有任何残留，就会呈现深红色。

4c)计算凋亡细胞的百分比（凋亡指数）和坏死的细胞的百分比：

凋亡细胞%=有凋亡核的细胞总数/计数细胞的总数×100%