支原体的分离培养鉴定

【标本采集】标本采集后应立即送检，室温保存不超过2小时，2—8℃保存不超过5小时。

男性：用男性无菌拭子插入尿道口内2—4cm处轻轻旋转取分泌物；也可取前列腺液或精液培养。必要时也可用尿液作支原体培养，取清晨第1次尿的中段尿10—20ml，经2000rpm离心10分钟，取沉渣接种，但尿液支原体培养阳性率明显低于尿道分泌物。

女性：用扩阴器扩阴后，用女性拭子在宫颈口内1—2cm处轻轻旋转取宫颈分泌物；也可用羊水培养。不推荐用尿液。

【培养】

1、培养管复温取出所需要数量的培养管，复温至室温，作好标记。

2、接种将拭子插入培养管，旋转并挤压数次，使拭子中支原体渗入液体中，拭子经灭菌处理后妥善处理；尿液沉渣、精液、羊水、前列腺液等液体标本取0.2ml接种培养液，充分混匀。

3、培养35—37℃恒温培养24—48h小时，观察结果。

1、Uu 、Mh生长应保持培养液透明清亮，无明显浑浊，偶遇浑浊者不得报支原体阳性。

2、Uu生长，培养液正常变色时间在24小时内，但如果标本含量少时，变色时间可能超过24小时。Mh生长，培养液正常变色时间在24—48小时之内，如果标本含量较大时，变色时间可能会小于24小时。

3、不能确定有无杂菌污染时，可将培养液取出少许接种于血平板或通过0.45um滤膜过滤培养，根据血平板菌落生长或过滤后培养的颜色变化来判断杂菌污染。