​TTC染色实验步骤

TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。故可以用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。

1、TTC染色实验步骤

（1）取脑：可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定，所以较软，取脑时更应仔细，保持大脑的完整性。

（2）-20℃冰箱中速冻20分钟左右，便于切片。

（3）切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。如果需计算面积的话，应切得均匀或用专门的脑槽。

（4）将切片置于2%TTC染色液中。

（5）用锡箔纸盖住后，放入37℃温箱15～30min，不时翻动脑片，使均匀接触到染色液。

（6）取出切片后摆放整齐拍照。

2、TTC染色结果判断

动物组织：非梗死区染为红色，梗死区呈灰白色，红色区与灰色区之间为缺血区。

植物样本：活组织呈玫瑰红色，死组织及无生命力的组织不着色。