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细胞技术

稳定表达细胞株的建立

2025-02-27 细胞技术 1 0 加入收藏
1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中(一般选用 1 : 10 和 1 : 100 两个梯度),分别采用 1200 m g/ml , 1000 m

1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中(一般选用 1 : 10 和 1 : 100 两个梯度),分别采用 1200 m g/ml , 1000 m g/ml 和 800 m g/ml 的 G418 进行筛选;

以转染携带 EGFP 质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照;

2 、每 3 ~ 4 天换液一次;

3 、筛选 20 ~ 30 天,即可得到稳定表达细胞株;

4 、传代后,以一定的 G418 浓度维持培养;


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