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24孔板里293细胞转染后面的孔里细胞死亡原因

2025-02-27 细胞技术 加入收藏
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问:我在24孔板里做293细胞的转染 ,转染试剂是Invitrogen的Lipofectamine2000。奇怪的是,每次加完DNA- Lipofectamine complex,24个孔当中的后面几个孔(比如最后6个孔)里的细胞就明显有一部分死亡,死亡率是10-30%,通常最严重的是最后两个孔。但是前面的孔里的细胞总是没有问题。用不同的DNA做实验,都发生同样的问题,就是总是后面的孔里细胞死亡,而前面的孔里细胞没问题。是怎么回事呢?

答:如果你在加DNA-Lipofectamine complex时孔板里是没有液体的,会在风机下风干的,很快的,这样你在加到后面的孔时,部分细胞已经干了,所以你先加的很好,后面的就有问题。解决办 法就是,你不要一起吸净所有孔的液体,6个孔为一个单位,吸弃孔里的液体,在加DNA-Lipofectamine complex,就可以了。


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