PriCells: 正常人羊膜细胞（HAM）原代细胞培养

实验材料：

1. 人胎盘；

2. PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（庆大霉素，50μg/ml；两性霉素B，1.25μg/ml；链霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；

3. 丙三醇；

4. 含50%丙三醇的DMEM；

5. 胰蛋白酶/EDTA；

6. Millicell微孔膜组织培养插片；

7. 塑料刮片和无菌棉拭子；

实验方法：

1. 用PBSA/GASP清洗组织；

2. 分离人羊膜，用戴手套的手从胎盘上将羊膜钝性分离下来，分离出的羊膜薄层包括上皮细胞，基底膜和一些基质组织；

3. 用无菌棉拭子除去基底膜下的基质组织，使分离的羊膜尽可能的薄；

4. 在监测供者血清以除外疾病的时期，可以将粗分离出的人羊膜保存在含有50%丙三醇的DMEM中，-70℃存放；

5. 临用前解冻人羊膜，用PBSA清洗后将其切成直径约为2mm的小块；

6. 用胰蛋白酶/EDTA消化组织块，37℃，30min；

7. 用塑料刮片轻刮消化过的人羊膜，除去上皮细胞，注意不要破坏基底膜；

8. 用PBSA清洗裸露的羊膜，并将它的基底膜面（去除上皮细胞的面）黏附在Millicell微孔膜组织培养插片上；