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细胞技术

人绒毛膜癌细胞株JAR的传代

2024-12-12 细胞技术 加入收藏
最初,用0.25%胰酶消化液传代,细胞脱壁容易,但是,吹打细胞180次左右,也只有80%细胞是单个细胞,而且,易引起细胞机械性损伤。于是,我改进方法。现在,我的

最初,用0.25%胰酶消化液传代,细胞脱壁容易,但是,吹打细胞180次左右,也只有80%细胞是单个细胞,而且,易引起细胞机械性损伤。于是,我改进方法。

现在,我的处理如下:

弃旧培养液

0.02%EDTA作用2分钟

弃EDTA

0.1%胰酶作用30秒

弃胰酶,继续消化2分钟

加培养液终止消化。一般吹打细胞30-40次,细胞基本为单个。

EDTA是一种化学螯合剂,主要作用主任已说。我要提醒一下:EDTA作用不受血清抑制,故消化后需彻底清除,否则影响细胞生长。

建议:可能的话离心一下。


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