原代细胞培养实验室组建的基本要求

一、实验室设计

1、细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。

2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。

3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，为10万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外，避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需要一个空调系统并对外界保持一定的正压。

4、解剖实验室主要用于对器官组织的分离，需要有无菌操作台、解剖显微镜、各种手术器材等。

二、实验室设备

1、超净工作台/生物安全柜细胞培养需要无菌要求高的环境，在进行操作细胞的实验时，需要在100级的空气下进行，那我们就需要购买能提供百级洁净度的超净工作台或生物安全柜了。

对绝大多数实验来说，超净工作台已经可以完全满足实验员的操作需要。

至于超净台的尺寸，要看实验室的大小以及人员的多少来确定，是买单人的还是双人的，是买单面的还是双面的，以及买几台等等。如果操作的实验具有生物危险性，则应选择较之超净台更加高级的生物安全柜。安全柜和超净台在使用上没有多大区别，但是安全柜对人员具有保护，适用于那些对人体有害的病毒或细胞细菌等实验。需要说明的是，超净台或安全柜的摆放应当避开房门，空调等扰动附近气流的地方。

2、二氧化碳培养箱

细胞培养所用的缓冲体系是碳酸氢钠+HEPES体系，所以需要二氧化碳提供缓冲能力维持pH。这时我们就需要一个二氧化碳培养箱来对细胞进行培养。并且由于二氧化碳培养箱通常不具有制冷压缩机，所以需要用户确定其细胞房内在夏天也有全天候的空调制冷，否则会造成箱内温度超标。

另外二氧化碳培养箱也分为气套式和水套式，所谓的气套式就是直接的电热丝加热，箱体升温较快，但是温度精度及保温效果会稍差；而水套式则利用浸泡在水中的电热丝加热包裹在箱体内胆外的水套来达到控温的效果，其升温慢但是保温的效果良好，即使短时间发生断电也不怕影响箱体内的细胞生长。

3、倒置显微镜

需要倒置显微镜的帮助。对于一些荧光免疫细胞实验（IF），则还需要购买倒置的荧光显微镜。

4、纯水机/超纯水机

细胞培养还需要超纯水系统，普通的纯水和蒸馏水是无法用于细胞培养的，而超纯水主要用于配置一些培养基和试剂，超纯水的进水可为自来水或二级纯水（质量好些的去离子水，电阻10兆欧左右），细胞培养用水除了超纯以外，最主要对内毒素有严格的要求，所以在挑选超纯水机的时候就要挑选含超滤组件的机型。

5、离心机

细胞培养需要离心收集传代细胞，一般转速在1000转到1500转之间，所以需要购买低转速的常温离心机，而且要带10ml，50ml及培养板的转子。另外还需要一台高速冷冻离心机用于收集细胞沉淀或细胞上清。

6、液氮罐

建立一个细胞库，液氮罐就是必须的，放入液氮罐内的冻存细胞一般可以保证在近十年的时间内都具有生物活性，至于需要多大的液氮罐要根据细胞库的大小而定。

7、低温冰箱

细胞在冻存时需要存放-70到-80度过夜再放入液氮罐，这样则需要一个低温冰箱。

8、传递窗

细胞房在构建时要与外界隔绝，这样就需要购买传递窗来传递物品，减少污染的几率，并且将所有进入细胞室的物品都在传递窗内进行紫外杀菌，可以保证洁净室的安全。

9、高压灭菌锅

各类细胞实验室器皿在使用前后都需要做灭菌处理，灭菌条件一般为121℃，20～30分钟，这样就需要一台放置在洁净室外的高压灭菌锅来保障生物安全性。

10、移液枪，电动移液枪

细胞实验操作时，需要使用各种吸头及移液管，所以配置移液枪是必要的。

11、细胞培养中需要的各种耗材

各类细胞培养板，细胞培养瓶，平皿移液管等。

12、其余仪器对于细胞实验还可能需要振荡器及磁力搅拌器用于混匀液体；还有一些沾满细胞的难清洗的不锈钢类或玻璃类器皿，则需要超声波清洗机的帮助；如果涉及免疫实验，肯定需要冰浴，碎冰的需求量大的话，则需要购买制冰机；另外破碎细胞可能会需要超声波细胞破碎仪；最后需提及的是如果细胞房较大，则要配备手推车，实验时搬动那些液体培养基总是件折磨人的事情。