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酵母的高效转化
摘要: 酵母高效转化的实验方法.1、接种5ml液体YPAD或10ml SC,30℃下 振荡 培养过夜.2、计数过夜培养物细胞密度,以最终5106个/ml的细胞密
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高效感受态细胞制备
方法一:效率非常高,一般可到10*8,好时可到10*9,特别适宜于大片段与文库构建及珍贵材料的连接转化。实验试剂:A液:1M,MnCl2B液:1M,HEPES,
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一种高效的胚胎干细胞转染方法
文章作者介绍了一种基于脂质体的高效siRNA转染方法。利用该protocol,可以在CCE细胞达到98%的转染效率,在D3细胞达到80%的转染效率,并且对干细胞
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用体内电穿孔术对哺乳动物骨骼肌细胞进行DNA转染
详细描述了进行成年小鼠趾短屈肌和骨间肌纤维DNA转染时的体内电穿孔术。要想有较高的转染效率,必须严格按照要求的步骤进行。 0:00 用体内电穿孔术进行哺乳动物骨
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感受态细菌的使用
一、对于感受态细菌效率的测定或连接产物的转化(其它如基因突变产物的转化等参考连接产物进行):1. 在冰上缓慢融解感受态细菌(对于新鲜制备的感受态就可以直接使用了
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细菌的转化与平板筛选
摘要: 本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理感受态是指 细菌 处于容易吸收外源 DNA 的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子
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感受态细胞的转化实验流程
1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物,轻轻吹打混匀,冰浴 30 min。3. 将菌液放入 42℃水浴中热激 90
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各种转染方法比较
转染方法 原 理 主要 应用 特 点DEAE-葡聚糖法 带正电的DEAE-葡聚糖与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞 瞬时转染相对简便、重
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DEAE-葡聚糖转染法
DEAE-葡聚糖介导的转染,其原理还不清楚,可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核,此法只适合暂时转染实验,转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与DNA
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脂质体介导DNA转染法
脂质体(lipofectin regeant,LR)试剂是阳离子脂质体N-[1-2,3-Dioleyoxy, Propyl]-n, n,n-Trimethyla
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外源质粒DNA转化大肠杆菌
摘要: 转化是将外源DNA分子通过物理或化学的方法导入基因工程细菌中的过程,是基因工程等研究领域的基本实验技术之一.外源质粒 DNA 转化 大肠杆菌1 实验简介
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细胞转染技术原理及应用
摘要: 讲述细胞转染技术分类,并分别介绍各种转染方法的原理、应用、特点,及各种转染方法的比较.常规 转染 技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久
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超级感受态细菌制备
碧云天生产的超级感受态细菌制备试剂盒(Supercompetent Cell Preparation Kit)是一种用于快速制备高转化效率大肠杆菌 感受态细菌的
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细胞转染技术简介
转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。一些传统的转染技术,如DEAE右旋糖苷法,磷酸钙法,电
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磷酸钙-DNA共沉淀法
核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可