-
制备高效率感受态的方法
有人提出, 冻存后转化效率降低且这种方法不适合大质粒.以下转贴为coli感受态细胞制备方法,具体方法请最好查阅文献.摘要:但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且
-
几种常用转化细胞和转化技术
介绍几种常用转化细胞和转化技术致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验实验步骤:1、取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎
-
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源
-
基因转染实验(DEAE－葡聚糖转染法)
DEAE－葡聚糖介导的转染，其原理还不清楚，可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核，此法只适合暂时转染实验，转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与 DN
-
电转化法制备大肠杆菌感受态细胞
1．前夜接种受体菌(DH5α或 DH10B)，挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜；2．取 2ml过夜培养物转接于200ml LB培养基中，在37℃摇床上
-
基因转染和实验设计原则
摘要： 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,基因转导的频率大约为10
-
用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌
摘要： 本文主要介绍了用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌的实验方法.下面的方法是对Cohen等于1972年发表的方法更为便捷的修改.下面的方法是对Cohen等于1
-
重组子的筛选
根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前
-
克隆/建库/表达专用超级高效感受态细胞
国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化，实验效率很高的。我总是 以为如果是一般的克隆实验，自己做感受态好像够用了－－如果是建库，购买现成的感受态细胞
-
一步法制备感受态细胞
一、操作步骤：1. 涂平板：为取得最佳的感受态效率，必须先把甘油菌或其它形式保存的菌种涂LB平板，并培养过夜。2. 接种：取一有新鲜培养的菌种的LB平板，后续操
-
腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞
摘要： 本实验从新生SD大鼠海马组织中分离神经干细胞，并通过观察携带EGFP基因的腺病毒（Ad/ EGFP）转染NSCS后EGFP表达规律及转染对NSCS的活力
-
用氯化钙制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
下面的简单方案是Clhen等（1972）所用方法的变通方案，常用于成批制备感受态细菌，这些细菌可使每微克螺旋质粒ＤＮＡ产生 5x106-2x107个转化菌落，这
-
重组质粒的筛选与鉴定
摘要： 可以在蛋白质水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子。可以在 蛋白质 水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子.基因水平的鉴定有酶切鉴定、 PCR
-
感受态细胞的制备
摘要： coli TG1单菌落,接种于5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,取50ul培养液转入5ml LB中,37℃振荡培养1~1.5小时至
-
瞬时转染分析法
摘要： 介绍5种瞬时转染分析法：瞬时转染分析法、稳定转染分析法、体外转录分析法、转基因分析法和同源重组分析法.1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究
