‌巨噬细胞原代培养实验报告‌

‌一、实验目的‌

▲掌握巨噬细胞原代培养的基本方法和操作过程。

▲了解巨噬细胞在体外培养条件下的生长特性和形态变化。

▲研究巨噬细胞在特定条件下的功能活性，为后续实验提供基础。

‌二、实验原理‌

巨噬细胞是机体免疫系统的重要细胞成分，具有强大的吞噬、抗原提呈和免疫调节等功能。原代培养是指直接从生物体内获取的细胞、组织和器官，经过体外培养后用于实验研究。本实验通过向小鼠腹腔内注射刺激物诱导巨噬细胞增殖，并提取后进行体外培养，观察其生长特性和功能活性。

‌三、实验材料‌

【1】实验动物：SPF级小鼠

【2】试剂：RPMI 1640培养基、胎牛血清、双抗（青霉素和链霉素）、巯基乙酸盐肉汤、PBS等

【3】器械：手术器械（手术剪、眼科镊、眼科剪等）、注射器、离心管、细胞培养板或培养瓶、显微镜等

‌四、实验方法‌

‌①腹腔巨噬细胞提取‌：

实验前三天，向小鼠腹腔注射巯基乙酸盐肉汤以刺激巨噬细胞增殖。

实验当天，处死小鼠并消毒后，剪开腹部皮肤暴露腹膜。

用注射器吸取预冷的PBS注入小鼠腹腔内，轻揉腹部使液体充分流动后抽取腹腔灌洗液。

将灌洗液进行离心分离细胞，用细胞培养基重悬后计数。

‌②细胞培养‌：

将细胞接种至细胞培养板或培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中孵育。

孵育一段时间后（如2-4小时），去除未贴壁的细胞及培养基，更换新的培养基继续培养。

根据实验需求进行后续操作，如细胞形态观察、功能检测等。

五、结论‌

本实验成功从小鼠腹腔中提取并培养了巨噬细胞，并观察到了其在体外培养条件下的生长特性和形态变化。通过进一步的功能检测，可以进一步研究巨噬细胞在特定条件下的生物学功能和应用价值。