Masson染色实验报告分析

一、实验目的

对样本进行Masson染色，用于显示组织中的纤维。

二、实验原理

用Masson染液进行染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色（被亮绿所染），肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染)，这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色，则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染，肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染，而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小，肌纤维与胞质次之，而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。

三、实验结果

胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。

四、实验通用设备与材料

1.仪器耗材

2.主要试剂

五、实验步骤

1.        石蜡切片脱蜡至水。

2.        铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

3.        依次自来水和蒸馏水洗。

4.        用苏木精染液染核5-10 min。

5.        充分水洗，如过染可盐酸酒精分化，蒸馏水洗。

6.        用Masson复合染色液染色10-20 min，蒸馏水洗。

7.        1% 磷钼酸水溶液分化3-5 min。

8.        不经水洗，直接用苯胺蓝或光绿液染5 min。

9.        以1%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

10.    95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固，显微镜观察。

二、常见问题分析及原因解析

1.        染色易脱片：组织本身破碎或过硬等，用防脱载玻片可适当解决。

2.        切片染色不均：取材固定不当，取材规范标准，固定彻底。

3.        切片染色模糊不清：包埋时蜡的温度过高。