如何进行MASSON染色？

一、染色步骤

⒈石蜡切片脱蜡至水：将组织切片置于适当的脱蜡液中，按照标准流程进行脱蜡，直至切片完全水化。

⒉铬化处理或去汞盐沉淀：根据组织固定方式的不同，可能需要进行铬化处理或去汞盐沉淀，以确保染色效果的稳定性。

⒊染色液的配制与染色：

·使用苏木精染液进行染色，染色时间控制在5-10分钟。

·充分水洗切片，去除多余的染色液。

·使用Masson丽春红酸性复红液进行染色，时间同样为5-10分钟。

⒋分化与反染：

·使用2%冰醋酸水溶液对切片进行浸洗，增强染色对比度。

·使用1%磷钼酸水溶液进行分化，使胶原纤维呈淡粉红色，肌纤维和纤维素呈红色。

·无需水洗，直接使用苯胺蓝或光绿液进行反染，使胶原纤维、粘液、软骨等组织成分呈蓝色或绿色。

⒌脱水、透明与封固：

·使用不同浓度的乙醇对切片进行脱水处理。

·使用二甲苯或其他透明剂对切片进行透明化处理。

·使用中性树胶进行封固，确保切片长期保存不褪色。

二、技巧与注意事项

①控制好染色步骤：每一步的染色时间和试剂浓度都会影响最终的染色效果，因此需严格按照实验步骤进行操作。

②组织固定的重要性：组织固定的方式和时间会影响染色效果，应根据实验需求选择合适的固定液和固定时间。

③注意试剂的保存与使用：确保试剂的质量和浓度稳定，避免使用过期或变质的试剂。

④观察与记录：在染色过程中，应随时观察切片的染色情况，并记录每一步的操作细节和染色效果。