ELISA原理、操作以及注意事项

（一）ELISA原理简介

ELISA，即酶联免疫吸附试验，是一种基于抗原-抗体特异性结合的免疫分析技术。其基本原理是利用酶标记的抗体或抗原与待测样本中的相应抗原或抗体发生特异性结合，通过酶催化底物显色反应来检测待测物质的含量。

二、ELISA操作步骤

[1]样本处理：根据实验要求，对样本进行适当的稀释或处理，以便后续操作。

[2]抗原或抗体包被：将抗原或抗体包被在固相载体（如微孔板）上，形成固相抗原或抗体。

[3]加入待测样本：将待测样本加入包被好的微孔中，与固相抗原或抗体发生特异性结合。

[4]加入酶标抗体：加入酶标记的抗体或抗原，与待测样本中的抗原或抗体结合，形成酶标复合物。

[5]洗涤：去除未结合的干扰物质，以提高实验的准确性。

[6]显色反应：加入底物，酶催化底物发生显色反应，形成有色产物。

[7]结果判定：通过测量有色产物的吸光度，与标准曲线对照，计算待测样本中抗原或抗体的含量。

三、注意事项

Ⅰ.实验环境：保持实验室环境清洁，避免污染。实验过程中要佩戴手套，避免直接接触样本和试剂。

Ⅱ.试剂保存：试剂应保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免受潮和高温。

Ⅲ.样本处理：样本处理过程中要注意避免交叉污染，确保样本的准确性和可靠性。

Ⅳ.实验操作：实验过程中要严格按照操作步骤进行，避免误操作导致实验结果偏差。

Ⅴ.结果解读：实验结果应结合标准曲线进行解读，避免主观臆断导致误判。