一看就会的油红O染色实验指南
实验原理油红O是很强的脂溶剂和染脂剂,较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料
实验原理
油红O是很强的脂溶剂和染脂剂,较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色,具体颜色因脂质浓度而定。因此,油红O染色方法可用于检测组织或细胞中脂肪油滴的存在和数量,尤其适用于脂质代谢疾病的研究。
如果您想进行油红O染色实验,以下是一些指南:
准备标本:您可以选择使用细胞或组织样本。确保您的样本是新鲜的,保存在冰箱或液氮中。
固定标本:将样本用4%的多聚甲醛或其他合适的固定剂进行固定,保证固定剂浓度充足并确保完全固定。
化学处理:将固定的标本进行化学处理,以去除其内部的脂质和其他物质。其中的一种方法是将样本用80%的乙醇浸泡24小时。
染色:在油红O染色液中将标本浸泡,时间可以根据需要自行决定,一般在30分钟至2小时之间。将标本移入去离子水或其他适合的缓冲液中冲洗,使其达到理想的染色效果。
显微镜检查:将标本放在显微镜下检查。您应该能够看到样本中的脂肪油滴,它们应该呈现出红色。
请注意,油红O染色实验不仅适用于脂肪的检测,也可以用于一些其他的实验和研究。
接下来我们具体看看是怎样的实验步骤,以c57小鼠的肝脏组织为例,将实验分为对照组和高脂模型组