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细胞技术

免疫荧光结果背景强怎么办?

2025-01-23 细胞技术 加入收藏
答:免疫荧光背景强是指不能清晰的看到实验目的中的特异性染色,有其他荧光的干扰,影响染色结果的分析和判断。出现荧光背景强的原因和处理如下:

        答:免疫荧光背景强是指不能清晰的看到实验目的中的特异性染色,有其他荧光的干扰,影响染色结果的分析和判断。出现荧光背景强的原因和处理如下:

        1、切片太厚。组织切片时切薄一点。

        2、封闭不佳。封闭不佳切片会非特异性染色增多,背景色增高,可以考虑换一种封闭液或增加封闭的时间。

        3、二抗有特异性结合。更换一种二抗。

        4、自体荧光。这是小编认为实验结果背景高最容易遇见的原因,动植物有的时候自身会带荧光,像水母夜晚拍摄是发光的,这种样品如果没有先做荧光猝灭就直接染色,会有背景荧光干扰,所以实验前我们要做好样本的荧光猝灭。

        5、抗体浓度太高。降低抗体的浓度或减少抗体孵育时间。


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