染色体分带技术

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染色体 显带技术是在显示染色体基础上发展起来的技术，其优点是能显现染色体本身更细微的结构，有助于更准确地识别每条染色体及染色体异常疾病。染色体分带技术能适用于各种细胞染色体标本。 　　染色体显带是沿着整条染色体的长轴，能显现出着色深浅不同、横向走的带型。目前认为染色体显带现象是染色体结构所致。但用特殊方法处理后，再用染料染色，则带型更加清晰，随显带方法不同，显现出的带型的特点也不一样，这说明带的出现与染料的特异结合相关。人类染色体能显现出近2000个G带，这些带再融合成一般显微镜下可见的850条左右的高分辩染色体带型或350条带左右的常规带型。 常见的几咱显带方法： （一）、G带 　　也称为G显带，是最常用的显带方法，具有操作简便、经济及标本能长期保存等优点。 1、Giemsa原液的配制： 　　（1）称3.75gGiemsa粉置研磨器中，加少许丙三醇研磨，研磨越细越好； 　　（2）将研细的Giemsa加丙三醇移入500ml棕色瓶内，丙三醇的总量为250ml，用一定量甲醇洗干净研磨器。 　　（3）摇匀，置60℃水浴锅24小时或37℃温箱72小时，经常摇动。 　　（4）取出冷却后，加甲醇总量至250ml混匀，密封棕色瓶备用。贮藏时间越长，染色效果越好。 2、实验材料： 　　中期染色体标本； 　　0.9%氯化钠注射水； 　　3%tris液体； 　　0.25%胰蛋白酶； 　　Gremsa染色液； 　　蒸馏水； 　　水浴锅； 　　立式染缸； 　　定时器或时针； 　　温度计； 　　镊子及纱布； 　　刻字笔； 3、操作程序： 　　（1）消化液配制：取0.9%氯化钠注射水100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml，制成0.025%胰蛋白酶盐水消化液，加4-5滴tris液调PH6.8左右，移消化液于立式染色缸并置37℃水浴锅中备用； 　　（2）染液配制：取立式染缸，加蒸馏水500ml，加3滴tris液调PH并加入Giemea染液1ml左右，用吸管调匀备用； 　　（3）漂洗液：取立式染缸一个，内加蒸馏水备用； 　　（4）试消化：待消化液温度在37℃左右时，取同批标本较多者标本1张，分二节或三节进行消化，每节相差十五秒左右，从45秒或60秒开始增减。取出后先在纱布或吸水纸上直立除去带出胰蛋白酶，后置蒸馏水染缸内漂洗，取出后，标本斜面朝上，刮去染色缸内染液上浮膜，沿槽插入，每分钟移动1次，染色3-5分钟。