实验用的植物组织蛋白样本怎样提取出来?
有两种方法,方法一针对SDS-PAGE,垂直板电泳,步骤如下:1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、
有两种方法,方法一针对SDS-PAGE,垂直板电泳,步骤如下:
1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。
3、用离心机离心8000rpm40min4C或11100rpm20min4C
4、提取上清夜,样品制备完成。
方法二是用三氯醋酸一丙酮沉淀法,离子浓度小的1、在液氮中研磨叶片,步骤如下:
1、加入样品体积3-204C8000rpm以上13、的β-巯基乙醇),摇匀后离心(4℃8000rpm以上14、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15'C8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
2、用Brandford法定里蛋白,然后可分装放入-80℃备用