果蝇的外部形态观察及饲养技术

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果蝇 的外部形态观察及饲养技术

【主要内容】 　　1.果蝇的外部形态观察及饲养技术 　　2.果蝇遗传性状系列杂交实验 　　3.数量性状遗传 　　4.粗糙链孢霉的杂交 　　5.人工诱发多倍体植物 　　6.果蝇唾腺染色体 　　7.人的外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 　　8.染色体G带技术 　　9.果蝇系列杂交实验结果的观察与统计【实验目的】 　　1、了解果蝇的生活史，识别雌雄蝇和几种 常用的突变类型。 　　2、掌握果蝇的饲养和管理技术为下一步果蝇的系列遗传实验作准备【实验原理】 　（黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）属双翅目昆虫，具有完全变态。作为实验材料具有如下优点： 　　　1.生长迅速，在25℃条件下，10～12天可完成一个世代； 　　　2.繁殖能力较强，1只♀果蝇可产卵400 ～ 500枚，因而可以在短时间内获得大量子代，有利于作遗传学分析； 　　　3.容易饲养，饲料易得，实验需用空间较小； 　　　4.突变性状达400以上，并且多是形态变异，便利于观察； 　　　5.染色体数目少(2n=8），突变基因容易在染色体上定位。 　　正是由于果蝇在实验上具有以上优点，所以T．H．Morgen能够以果蝇为实验材料验证了孟德尔的分离定律和自由组合定律，并且发现了连锁遗传定律。【1.果蝇外部形态的观察】

　（1）果蝇生活史的观察 　　卵：♀♂果蝇羽化后12小时内不能交配，所以选处女蝇要利用这12小时。超过12小时开始交配，2天后开始产卵，每只雌果蝇一生中可产卵400—500枚，卵长0．5mm，椭圆形，端部两侧各具一纤丝。 　　幼虫：受精卵经1-2天孵化（25℃时12小时开始孵化），经4-5天2次蜕皮，成为3龄幼虫，体长可达4-5mm。 　　蛹：3龄幼虫爬上培养瓶内壁化蛹，蛹梭形、由淡黄至黄褐色。 　　成虫：蛹期约4天开始羽化，一般傍晚羽化的数量比黎明的多。刚羽化的成虫体较大。色较淡、翅还未展开、体表因未完全几丁化（chitinous）而显得较软。

果蝇世代图

　（2）野生型与突变型相对形状的观察 　　1.逐一麻醉各品系果蝇（注意要适度麻醉）。 　　2.把麻醉的果蝇倾倒在白瓷板上，移到解剖镜下观察。 　　3.鉴别野生型与突变型的相对性状。

果 蝇 类 型 复 眼 体 色 翅 型 刚 毛 野生型红色灰黄长翅直突变型白色黑檀残、短卷曲 图片： 野生型与突变型果蝇的眼色 野生型与突变型果蝇的体色 野生型与突变型果蝇的翅形 野生型与突变型果蝇的刚毛 直刚毛 卷刚毛

　（3）雌雄果蝇的观察与鉴别 　　第一性征： 　　　♂ 腹部末端无几丁化黑点 　　　♀腹部末端有几丁化黑点 　　副性征： 　　　A.腹部末端尖长（ ♀ ）对顿圆（♂ ） 　　　B.腹部背面有3条黑色条纹对5条黑色条纹 　　　C.腹部腹面有4各腹片对6个腹片 　　　D.第一对足的跗节有性梳对无性梳 　　　E.体型较大对较小 　　图片： 雌雄蝇 雌雄果蝇形态特征比较 果蝇第一对足跗节基部的性梳

【2.果蝇的培养】 （1）培养基的配制 　　　培养基配方： 　　　　 以配制1000ml为例，需要红糖80克，琼脂10克，麦麸80克，玉米粉20克，丙酸7ml，酵母10克。 　　　配制方法： 　　　　1.将红糖80克、琼脂10克、水700ml置于锅里共煮沸至全溶化。 　　　　2.麦麸80克，玉米粉20克，水300ml调成糊状。 　　　　3.将2加入1中边煮边搅拌，连续煮沸20min，离火立即加入丙酸7ml，酵母10克，搅拌均匀，趁热分装到消毒过的培养瓶。

　(2)接种蝇培养 　　　 待培养基冷却，水蒸气挥发后，塞好棉塞接好蝇种，放入25℃恒温培养箱中培养。

【注意事项】 　　1.分装培养基时注意不要沾到试管或培养瓶口，如果沾到，则待培养基凝固后，用拧干的酒精棉球把培养基下推，以免棉塞蘸到培养基，造成污染。 　　2.配好的培养基应放到干净的地方保存。 　　3.在接放果蝇时，要注意正确使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好，同时实验室保持通风。【作业】 　　1. 把观察五个品系的相对性状结果填入下表。 品系 复眼 体色 翅形 刚毛 2 #6 #18 #22 #e 　　2. 把鉴别雌雄果蝇的第一性征、副性征填入下表。雌雄外生 殖器腹部 末端腹部 背面腹部 腹面性梳体型 大小♀♂ 　　3、问答题： 　　　（１）在５个果蝇品系中哪一个品系是野生型？ 　　　（２）用肉眼分拣雌雄果蝇时，应抓住哪一主要特征？如何挑处女蝇？ 　　　（ 3）要完成三个实验（果蝇的单因子实验、果蝇的伴性遗传实验、果蝇两对基因的自由组合实验）的正确杂交组合，要求用实验室现有的5个品系，设计6个杂交组合（每一个实验有正交和反交组），如何设计？