Hanks液的配制方法步骤及其注意事项
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Hanks 液是生物医学实验中极为常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solutions,简称 BSS)之一,简称HBSS。主要用途是用于配制培养液,稀释剂以及细胞清洗液,但是不能单独作为细胞/组织培养液。本详细表述了Hanks 液平衡盐溶液的配制方法和步骤。
原液A | ||
NaCl | 160g | |
MgSO4 ·7H2 O | 2g | |
KCl | 8g | |
Mg Cl2 ·6H2 O | 2g | |
CaCl2 | 2.8g | |
溶于1000ml双蒸水 | ||
原液 B | ||
(1) | Na2 HPO4 ·12H2 O | 3.04g |
KH2 PO4 | 1.2g | |
葡萄糖 | 20.0g | |
溶于800ml双蒸水 | ||
(2) | 0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100ml。 | |
将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,即为原液B。 | ||
应用液 | ||
原液A | 1份 | |
原液B | 1份 | |
双蒸水 | 18份 | |
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3 调pH至7.2~7.6 |
注意事项:
酚红对细胞有一定的毒性,可根据自己的实验选择一定的量,酚红所加的用量不一样,溶液的颜色也会有少许变化。此外配制hanks液所用的试剂必须达到一级GR或者二级AR规格。