昆虫细胞的培养液适应[4阶段]

第一阶段： 1．准备合适体积的由25%体积新培养液和75%旧培养液（即细胞原先适应的培养液）组成的混合培养液I。 2．将细胞以通常分装时使用的最低分装密度的两倍分装到混合培养液I中。 3．使细胞生长到通常培养时的较高密度，监测细胞生长参数。 4．继续以步骤2中的密度分装细胞到新鲜的混合培养液I中，直到生长参数达到可以接受的水平。有时候分装一次就可达到要求。 5．一旦细胞稳定下来，以通常使用的最低分装密度分装细胞至新鲜的混合培养液I中，同样监测细胞参数。 6．细胞达到较高密度后，继续以步骤5中的分装密度把细胞分装到新鲜的混合培养液I中，直到细胞的生长参数达到可以接受的水平。 7．如果细胞恢复到正常状态，进行第二阶段的实验。 8．如果细胞不能达到正常状态，新培养液可能不适于培养这种细胞。 9．如果细胞在新培养液中的生长参数达到平衡状态，虽然与正常状态不同，但是可以为实验接受，也可进行第二阶段的实验。 第二阶段： 1．准备适量的由50%新培养液和50%旧培养液组成的混合培养液II。 2．将细胞以两倍最低分装密度分装至混合培养液II中。 3．如第一阶段一样，监测细胞生长指数，使细胞达到稳定状态。然后将分装密度降到最低分装密度，再使细胞达到稳定状态。 第三阶段： 步骤同第一阶段和第二阶段，使细胞适应混合培养液III（75%新培养液和25%旧培养液）。 第四阶段： 1．步骤同第一阶段、第二阶段和第三阶段，使细胞适应新培养液。 2．当细胞在新培养液中达到稳定后，监测细胞的生长指数，看是否波动过大。