琼脂糖凝胶电泳技术

相关专题

1、实验目的： 学习与掌握DNA电泳的技术方法，利用琼脂 糖凝胶电 泳检测DNA纯度、含量以及分子 量，及分离不同大小 DNA片段。 2、实验原理： 电泳概念及种类* • 电泳： 是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象 电泳基本原理 迁移率（或泳动度）是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度，可用下列公式计算： Ｕ =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/Vt Ｕ为迁移率（cm2·V-1·min-1）；υ为颗粒泳动速度（cm·s-1）；E 为电场强度（ V·cm-1）；d 为颗粒泳动的距离（cm）；l为滤纸有效长度（cm）；V为实际电压（V）；t为通电时间（s或min）。通过测量d, l, V, t, 即可计算出被分离物质的迁移率。 1迁移率单位= 10-5 cm2·V-1·min-1在确定的条件下，某物质的迁移率为常数，是该物质的化学特征常数 颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反之则泳动速度慢。 迁移率还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，迁移率与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径成反比。 影响琼脂糖电泳迁移的主要因素* 电场强度 溶液的pH值 溶液的离子强度 电渗现象 温度的影响 支持物的影响

电泳的分类 按分离原理分类： 1.区带电泳 2.移界电泳 3.等速电泳 4.聚焦电泳 按有无固体支持物分类