核酸的电泳与检测
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相关专题 【实验目的】 (1)了解核酸琼脂 糖凝胶电泳的原理,学会其具体的操作程序。 (2)对提取的DNA进行检测,掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。 【实验原理】 琼脂糖凝胶电泳 是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳,核酸分子是两性解离分子,在pH8.0时,DNA分子带负电荷在电场中向正极移动。采用琼脂糖凝胶介质作为电泳支持物,长度不同的DNA分子由于受凝胶阻遏作用大小不一,迁移速度不同,从而达到有效分离DNA的目的。 【仪器、材料、试剂】 (一)仪器 1.电泳装置:电泳仪 、水平电泳槽、梳子、制胶槽 2.紫外观察:凝胶成像系统 3.高速离心机 (二)材料 1.琼脂糖 2.三羟甲基氨基甲烷(Tris) 3.硼酸 4.乙二胺四乙酸(EDTA) 5.溴酚蓝 6.蔗糖 7.溴化乙锭(EB) 8.DNA Marker(λDNA) 9.称量纸、容量瓶、瓷盘、一次性手套、取液器、三角瓶、量筒(100mL)、Tip头(10uL)、胶带 (三)试剂配制