人Ph+急淋白血病细胞系
人Ph+急淋白血病细胞系 一.人Ph+急淋白血病细胞产品简介1、细胞名称:Sup-b15;人Ph+急淋白血病细胞2、生长特性: 悬浮 3、人Ph+急淋白血病细胞
人Ph+急淋白血病细胞系
1、细胞名称:Sup-b15;人Ph+急淋白血病细胞
2、生长特性: 悬浮
3、人Ph+急淋白血病细胞生长条件:
培养条件 IMDM+20%FBS+1%P/S
温度 37℃
空气条件 5% CO2,,95% AIR
传代方法 首次建议1:2传代,2~3天换液
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
二.人Ph+急淋白血病细胞使用方法
1、您收到人Ph+急淋白血病细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出细胞培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、人Ph+急淋白血病细胞传代:
待人Ph+急淋白血病细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
贴壁细胞需要用胰酶进行消化。
3、人Ph+急淋白血病细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、人Ph+急淋白血病细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
注:培养瓶内非完全培养基,请务必使用准备好的新鲜培养基。悬浮细胞运输中会有少些细胞因为碰撞裂解产生碎片,收到细胞如碎片较多时,胎牛血清可以用15%培养三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞稳定后再调回10%即可。