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微生物学

人卵巢癌细胞胞(CoC1)

2024-11-25 微生物学 加入收藏
人卵巢癌细胞胞(CoC1)人卵巢癌细胞胞(CoC1)介绍人卵巢癌细胞胞(CoC1)建系于1993 年(熊世钢等)。细胞于原代培养至第17 天首次传代,以后反复传

人卵巢癌细胞胞(CoC1)

人卵巢癌细胞胞(CoC1)介绍

人卵巢癌细胞胞(CoC1)建系于1993 年(熊世钢等)。细胞于原代培养至第17 天首次传代,以后反复传代,生物学特性稳定。可表达多种肿瘤标志物和野生型P53 蛋白、突变型P53 蛋白。裸鼠接种产生分化差的腺癌。

人卵巢癌细胞胞(CoC1)特性:

1) 来源:卵巢癌

2) 形态:圆形或椭圆形,悬浮生长

3) 含量:>1x106 /mL

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25 瓶或者1mL 冻存管包装

运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;

2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

人卵巢癌细胞胞(CoC1)用途:仅供科研使用。

人卵巢癌细胞胞(CoC1)培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠0.11g/L)90%;优质胎牛血清,10%

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37 摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心分钟,弃去上清液,补1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm 皿中,加入约8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞1000RPM 条件下离心分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按11的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按11的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM 条件下离心分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

注意事项:

1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。


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