湿热灭菌

2.1常压间歇灭菌

  【总操作程序】

   主要分4步：装入待灭菌物品     灭菌     灭菌后的物品放置室温下     连续3d

   具体操作如下：

   ①装入待灭菌物品

   需要灭菌的物品包装好后放置于蒸汽灭菌器或蒸笼中。

   ②灭菌

   加热100℃，保持30min。

   ③灭菌后的物品放置于室温下

   取出灭菌后的物品放置于室温下18～24h。

   ④连续3d

   第二天再加热100℃，灭菌30min，灭菌后的物品取出放置于室温下，第三天再同样处理一遍，可达到完全灭菌的目的。

【达标标准】

 物品应达到完全灭菌，如果是灭菌培养基放在37℃温箱培养24h，无杂菌生长，即可待用。

【注意事项】

 ①不能用于怕受潮物品的灭菌。

 ②适用于不易用高压蒸汽灭菌的培养基如明胶培养基、牛乳培养基、含糖培养基等。

 ③灭菌后的器皿，在使用前勿打开包装纸，以免被空气中的杂菌污染。

【相关知识】

 ①根据情况，湿热灭菌也可以采用煮沸灭菌，时间为10～15min,这样可以杀死细菌所有营养细胞和部分芽孢。如延长煮沸时间，并在水中加入1%碳酸氢钠或2%石碳酸，效果更好。

 ②灭菌一次30min，只能杀死微生物的繁殖体、真菌的孢子和细菌的部分芽孢，而不能杀死所有的芽孢。当把第一次灭菌后的物品放置室温下时，物品上残存的芽孢就会萌发，变成繁殖体，繁殖体对热力的抵抗力远远弱于芽孢的抵抗力。因此，当第二次灭菌时，又可以杀死芽孢形成的繁殖体。这样进行三次，即可达到完全灭菌的目的。

   ③湿热灭菌是用饱和水蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率要比干热法高。