脊髓机械性损伤模型的制作实验-大鼠脊髓挤压伤模型
原理
脊髓夹伤模型可模拟临床上脊柱移位所致脊髓持续受压损伤,同样是应用较多的模型。该类模型可获得相对稳定的脊髓损伤,适用于病理和脊髓再生等多方面研究,尤其是脊髓受损程度(挤压强度和/或持续时间)与所导致的神经病理损伤后果的关系。现有脊髓夹伤模型种类较多,分别应不同造模目的而设计。其中应用较多的包括动脉瘤夹夹伤,强调挫伤与持续挤压的结合,以及挤压强度和时间可控性;摄子夹伤模型,为不完全挤压,强调残留组织以及运动功能的一致性。
(1)动脉瘤夹夹伤以动脉瘤夹沿腹背向迅速闭合并维持闭合状态一定时间,造成挫伤-待续挤压伤联合损伤模型,调整动脉瘤夹闭合的力量和闭合维持时间可获得不同程度损伤。
(2)摄子夹伤使用摄子自脊髓两侧向内挤压,造成脊髓夹伤模型,调整摄子闭合时保留的间距和闭合维持时间可获得不同程度损伤。
材料与仪器
实验动物1%戊巴比妥钠 碘伏
手术刀 眼科摄(2个) 眼科剪 乳突撑开器 小型咬骨钳 针持 线剪 缝针 缝线 剃毛推子
步骤
(1)动脉瘤夹夹伤选择弯曲弧度和厚度与造模用动脉瘤夹相近的分离钩,分离脊髓和腹侧椎管。夹子下臂伸入脊髓与腹侧椎管之间,上臂千脊髓背侧,迅速释放动脉瘤夹并保持一定时间(如1min)(见图4-2B),打开并移去动脉瘤夹。逐层缝合肌肉皮肤。
(2)摄子夹伤摄子垂直于脊柱,两齿内侧分别紧贴脊髓两侧下降至镊子尖端触到腹侧椎管。缓慢匀速闭合摄子(如1s内)并保持一定时间(如15s)。释放摄子至闭合前宽度并移去。逐层缝合肌肉皮肤(图4-4)。依损伤程度不同,脊髓挤压处可见或轻或重之出血线。
注意事项
(1)挤压脊髓过程,操作要稳、匀速。
(2)尽量保证同一实验模型由同一人操作。
(3)依照实验需要,选择合适的损伤程度(镊子闭合间距)。间距0.5mm的损伤,可以获得稳定的损伤,个体间差异较小,因为过轻损伤会相应增加误差的干扰,过重损伤出血较重难于控制和预测,也增加误差。
常见问题
(1)动脉瘤夹弹簧弹性决定夹子闭合力大小,以造成多种损伤程度的模型(图4-2)。
(2)夹伤过程夹子下臂伸入脊髓与腹侧椎管之间,上臂于脊髓背侧,动脉瘤夹闭合并停留1min(图4-3)。选择合适尺寸的摄子,在摄子两臂间固定一定厚度的垫片,以使摄子闭合状态下两齿间留有一定距离(如1.2mm)。