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生物化学

胰凝乳蛋白酶-用 SUPHEPA 测定

2024-12-07 生物化学 加入收藏
材料与仪器α-胰凝乳蛋白酶三甲醇胺-NaOH 三甲醇胺-NaOH N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺分光光度计步骤实验所需「试剂」具体见「其他」在 25℃。测定

材料与仪器

α-胰凝乳蛋白酶
三甲醇胺-NaOH 三甲醇胺-NaOH N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺
分光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

在 25℃。测定 405 nm 吸光值增加,对硝基苯胺的吸收系数为 ε405=10.2×103 l(mol · cm)

常见问题

试剂:

0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH,pH 7.8(TEA,37.13 g TEA-HCl,2.2 g 氯化钙溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8,加水至 1 L),即缓冲液Ⅰ

0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH,pH 7.8(TEA,37.13 g TEA-HCl 溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8,加水至 1 L),即缓冲液Ⅰ

60 umol/L α-胰凝乳蛋白酶(15.2 mg 溶于 10 ml 1 mmol/L HCl 中)

0.1 mol/L N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺(SUPHEPA;Mr=385.4;385 mg溶于 10 ml 缓冲液Ⅱ)

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