天然培养基配制实验-鸡胚浸出液的制备

鸡胚浸出液内含有生长因子、大分子核蛋白和小分子氨基酸等，有刺激细胞生长作用，为早年培养使用的培养用液，现已被合成培养液所代替，但在某些研究中仍有一定应用价值。

材料与仪器

鸡卵
酒精 碘酒 BSS
孵化箱 烧杯 注射器 离心机

步骤

1.  孵化
选健康受精鸡卵，置入37 ℃温箱孵化；箱内置有水皿，以保持箱内湿度，每日翻动卵一次（180 度）；
2.  处理
孵育至9—12 日，取出鸡卵置小烧杯中，令气室端向上，用碘酒和酒精消毒蛋壳；
3.  取胚
用消毒剪剪除气室端蛋壳，小心拨开尿囊膜，用弯玻棒或变镊伸到胚体颈下方，轻轻挑起鸡胚置入平皿中；
4.  清理
去掉胚眼、血块、尿囊膜等物；用BSS 冲洗鸡胚；
 5.  粉碎
置入烧杯中用剪刀剪碎胚体后，再用组织研磨器研磨；或放入20—50 ml注射器中（无针头）直接压挤入无菌小烧杯中；
6.  浸出
加入等量的Hanks 液，用吸管轻轻吹打均匀，密封后置37 ℃温箱中30 分钟；
7.  分离
3000 转/分，离心30 分钟，无菌取上清分装入小瓶中，－20 ℃保存；用前再离心一次，取上清使用。

注意事项

1.  全部操作过程要保持无菌，要剔除尿囊膜和眼睛等，以免对细胞产生不良作用。