常用培养基配方(一)
1、 糖发酵管
成分:
牛肉膏 5g
蛋白胨 10g
氯化钠 3g
磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O) 2g
0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12ml
蒸馏水 1000ml
pH7.4
制法:
1、葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2、其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将5ml糖溶液加入于100ml培养基内,以无菌操作分装小试管。
注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。迟缓反应需观察14~30d。
2、ONPG培养基
成分:
邻硝基酚β-D-半乳糖昔(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG) 60mg
0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10ml
1%蛋白胨水(PH7.5) 30ml
制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5ml,用橡皮塞塞紧。
试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1~3h和24h观察结果。如果β-半乳糖苷酶产生,则于1~3h变黄色,如无此酶则24h不变色。
3、西蒙氏柠檬酸盐培养基
成分:
氯化钠 5g
硫酸镁(MgSO4•7H2O) 0.2g
磷酸二氢铵 1g
磷酸氢二钾 1g
柠檬酸钠 5g
琼脂 20g
蒸馏水 1000ml
0.2%溴麝香草酚蓝溶液 40ml
pH6.8
制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化。然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min。放成斜面。
试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色。