乳鼠心肌细胞培养经验

1、如果细胞状态不好，可能是消化或者培养基的原因，细胞胞浆会出现空泡，一旦出现过多，细胞基本不能用。

2、心肌细胞不能传代。

3、心肌细胞有聚集生长的特性，培养时间长点，一般超过4天后，细胞会聚集成小岛状，以小岛为中心搏动，当然有小岛说明细胞密度较小。

4、心肌细胞的状态与细胞密度有很大关系，一般细胞密度越大，心肌细胞相对来说越容易长好，达到同步搏动的时间也快。

5、心肌细胞同步搏动不难达到，基本上消化培养的过程合理一点，密度大一点，密度小的时候24小时换液时就能见到个别细胞搏动，密度大的时候偶尔能见到同步搏动，48小时基本能看到同步搏动。

6、心肌细胞既然有聚集生长的特性，所以容易粘附在一起，那些状态不好或没贴壁的细胞会粘附在贴壁细胞上面，导致细胞图片不好看，尤其是细胞爬片，拍照时受很大影响。但这种情况一旦换液会改善很多。尤其是细胞状态好的时候，换液时稍微吹打，洗2次左右，整个视野会干净而且明亮，当然这和细胞状态有很大关系，状态不好，怎么洗都没用。

7、心肌细胞形态各异，48小时内基本从圆形---条状，但厚实---多边形，一般三边或四边---慢慢的会有突起，类似轴突产生，这时细胞容易聚集成岛状，细胞边界不是很明显。而且如果细胞不纯，经常有成纤维细胞，会对心肌细胞的形态，边界判断造成很大不便。

8、心肌细胞的纯化不容易，问题最大的是成纤维细胞，一般来说个人感觉无法完全去除，而且纯化过程多少对心肌细胞也有损伤，如差速贴壁，加5溴鸟苷等。

9、心肌细胞培养有时会产生一些黑点，众说纷纭，换液后会改善。

10、心肌细胞培养总的来说条件比较难确定，养成不难，养好不易。需要注意每个细节，个人认为细胞状态的重复性很差。