细胞的体外培养检测产品生物性能

1.实验目的：

通过细胞的体外培养来检测产品的生物性能是否达到要求。

2.实验原理：

体外培养的细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。

培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。通过贴壁细胞的传代培养，观察细胞的生长状态可以反映出培养产品是否达到细胞培养的要求。

3.实验材料：

3.1 抽检样品：

3.2 细胞株：VERO细胞系：完全贴壁细胞，主要用于接种病毒的一种细胞。

3.3 实验试剂：RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶（876536）、小牛血清（8187648）、都购自广州英韦创津生物试剂公司。

3.4 实验耗材：3ml的巴斯德吸管、酒精灯、镊子、酒精棉球。

3.5 实验仪器：XDS-1倒置显微镜购自广州粤显光学仪器科技有限公司；

超净工作台购自苏州净化仪器设备公司；

4.实验步骤：

4.1. 在倒置显微镜下观察细胞形态和密度，取生长良好的细胞若干瓶，弃掉旧培养液。

4.2. 加入胰酶消化细胞，消化适度后倒去胰酶。

4.3. 加入适量培养液反复吹打数次。

4.4. 细胞计数稀释细胞密度为1×105/ml

4.5. 将细胞接种于抽检样品中：

5.实验结果：

1、Vero细胞培养24小时后10×10倍

2、Vero细胞培养48小时后10×10倍

3、细胞计数

6.结果判定

这次抽检样品做细胞培养检测，细胞生长状态正常，贴壁生长良好，10%血清培养液培养，细胞增长率符合企业标准。