原代细胞染色技术

一．台盼蓝染色

（1）制备单个细胞悬液，并作适当稀释（106 细胞/ml)。

（2）染色：取9滴细胞悬液移入小试管中，加一滴0.4%台盼蓝溶液，混匀。

（3）计数：在3分钟内，用血球计数板分别计数活细胞和死细胞。

（4）镜下观察，死细胞被染成蓝色，而活细胞拒染。

（5）根据下式求细胞活力:

二．伊红Y染色

（1）制备1×106 -5×106 细胞／ml的细胞悬液。

（2）取0.1ml细胞悬液加0.1ml伊红Y染液混合。

（3）用计数板镜下计数活、死细胞数。

（4）镜下观察，着红色的为死细胞。按公式计算细胞活力。

三．苯胺黑染色实验

（1）制备1×106 -5×106 细胞／ml的细胞悬液。

（2）将1份1%苯胺黑溶液与含血清生理盐水作1：9混合稀释，使其成0.1%苯胺黑染液。

（3）取0.1ml细胞悬液加0.1ml苯胺黑染液混合。室温放置10分钟。

（4）用计数板镜下计数 ，黑色细胞为死细胞，按公式计算活细胞率。