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细胞技术

大鼠系膜细胞传代

2024-12-11 细胞技术 加入收藏
我用的是DMEM低糖培养液,每次传代前,将培养液,PBS,0.25%的胰酶(没加edta),放37度烤箱预热(此做法是减少4度的凉液体对细胞的刺激,以防细胞死亡

我用的是DMEM低糖培养液,每次传代前,将培养液,PBS,0.25%的胰酶(没加edta),放37度烤箱预热(此做法是减少4度的凉液体对细胞的刺激,以防细胞死亡)。

每次换液时,一定要烧培养瓶口,做好无菌观念。

先抛弃旧液,用PBS先冲净残留的血清,再加PBS用滴管轻轻的吹打细胞,将死细胞吹打掉。

加胰酶时注意:若用加edta的,记住了,在镜下看到细胞在收缩时,赶快吸出胰酶,加血清中止消化。血清可抑制胰酶的活性,但对edta无效。前后大概不到10秒。若用没有加edta的,时间要适当延长,看到细胞变为有立体感时,加血清,轻轻拍打,细胞就会散开。若团块大,可用滴管吹打。

动作一点要快,不能让细胞离开培养箱时间太长。


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