人胃腺癌细胞MNK-45体内传代及接种实体瘤

人胃腺癌细胞MNK-45体内传代及接种实体瘤的详细步骤：

1、收集对数增长期的MNK-45细胞若干瓶,制备成瘤细胞悬液1*10^8个/ml左右接种到裸鼠胁部皮下。

2、待肿瘤生长到0.8g左右时，选择1-2只荷瘤（瘤块必须要求生长良好且无破损）裸鼠，颈椎脱臼处死，置75%酒精浸泡1-2分钟后裸鼠置超净工作台，于无菌条件下，剥取瘤块并将瘤块置200目细胞筛用玻璃棒研磨后用生理盐水或培养液冲洗。

并用1容器收集瘤细胞悬液，待吹打均匀后置10 ml离心管，1 000 r/min离心5 min，倾出上清，如此反复冲洗1-2次，然后用生理盐水或培养液适当稀释瘤细胞悬液，将肿瘤细胞数调到1*10^8个/ml左右，接种到裸鼠胁部皮下。

3、下次传代重复第二步骤即可。此外，实验接种时也可用此法，不过应将接种细胞数适当减少。我个人认为用这种方法比用培养的细胞接种传代好。原因如下：A 接种后的肿瘤形成率高。B 用1-2只裸鼠，就可制备许多细胞悬液。C 省时省力。