肝癌动物模型建模实验-VX2 移植性肝癌模型法

VX2 移植性肝癌模型法模型为目前国内最大的动物验性肝癌模型，实验证明该模型为富血管性肝癌动模型，其供血动脉为肝动脉，血供类似于人体原发性肝癌，该模型具有制作简单易行，价格相对低廉，实验周期短，实验成功率高等特点。

原理

VX2 移植性肝癌模型法的基本原理是将 VX2 瘤组织块置于生理盐水制成细胞悬液，取约 1 mL 注射于兔大腿内侧肌肉间，3 周后在无菌条件下剥离肿瘤组织，将肿瘤组织块修整为大小 1～2m㎡，于无菌条件下将 2～3 块剪碎的瘤株植入，分别于接种后第 2、3～4 周行 CT 扫描，观察移植瘤的成活情况和肿瘤的情况。病理常规 HE 染色动态观察，即确定肝癌诱导的发生。

材料与仪器

器材：

手术工具、无齿镊、眼科镊、VX2 瘤组织块、兔。

试剂：

①生理盐水;

②地西泮 5 mg／kg＋氯氨酮 80 mg／kg;

③庆大霉素。

步骤

VX2 移植性肝癌模型法的基本过程可分为如下几步：

A 接种用 VX2 肿瘤株的制备：将 VX2 瘤组织块置于生理盐水制成细胞悬液，取约 1 mL 注射于兔大腿内侧肌肉间

B 3 周后取荷瘤兔，用地西泮 5 mg／kg＋氯氨酮 80 mg／kg 全麻后，在无菌条件下剥离肿瘤组织，并将其置于盛有生理盐水的容器中，用眼科剪剔除豆腐渣样坏死组织和带有血管的肿瘤间质，尽量剪碎肿瘤边缘灰白色鱼肉样组织，直至肿瘤组织块大小 1～2m㎡。

C VX2 移植性肝癌的接种：采用开腹包埋法接种，实验大白兔用上述方法全麻后，固定其四肢备皮后，于无菌条件下在剑突下沿腹正中线逐层切一长约 3 cm 纵向切口。用无齿镊夹住肝脏并提出腹腔，以眼科镊于肝左中央叶较厚处刺破肝组织并形成口小（3～5 mm）底大（5～8 mm）的「烧瓶」样窦道，将 2～3 块剪碎的瘤株植入其中，并以明胶海绵碎块埋塞窦口。拔针后立即用明胶海绵块压迫，确认无明显出血后，回纳肝脏于腹腔并逐层关腹，庆大霉素 4 万 U 清洗切口

D 术后 3 天肌内注射青霉素 105 U／kg，每日 2 次。

注意事项

1 制备该动物模型应严格无菌操作，避免因感染导致的接种失败，动物死亡。移植后使用抗生素预防感染，可提高成功率。剥离的肿瘤接种时间应尽可能缩短，手术时间应缩短，力求对动物影响小，术后恢复快。饲养环境因素适宜，对动物的生长发育和移植肿瘤的生长及实验的准确性都产生很大的影响。