原代细胞计数技术

原代细胞计数技术：

1、准备计数板：用酒精清洁计数板及专用盖玻片，然后轻轻拭干。

2、制备细胞悬液：用消化液分散单层培养细胞或直接收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。要求细胞密度不低于104/ml，胞数很少，应将悬液离心（1000rpm，2分钟），重悬浮于少量培养液中。

3、加样：用习惯轻吹打细胞悬液，取少许细胞悬液，在计数板上盖玻片的一侧加微量细胞悬液。

4、计数：计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算： 细胞数/ml＝4大格细胞总数/ 4×10000。