新购进细胞株的问题
正在定购MG63 ,即人成骨头瘤细胞,但是以前没买过,都是从别人那直接扩培的,所以对于刚拿到细胞株要做的不清楚,恳请有经验的战友提供帮助。打算买三瓶,新购进时应
正在定购MG63 ,即人成骨头瘤细胞,但是以前没买过,都是从别人那直接扩培的,所以对于刚拿到细胞株要做的不清楚,恳请有经验的战友提供帮助。
打算买三瓶,新购进时应该会配培养基,那我是否需要提前配培养基(按厂家提供的培养基配方,是一拿到手直接冻到液氮里吗?还是先培养几天再冻?查文献发现很多种培养基都可以用,可否用实验室已有培养基培养,大约需要多久后才能用实验室的培养基培养。
对于新买的细胞,必然是有说明书的,建议先定购说明书中的培养基,扩增后可以试试其它的培养基,当然是因为经费的问题。一拿到手可以先放到液氮里面,如果不能充分准备后马上培养。最好你扩增到第3代后用实验室以前用过的培养基。
收到复苏状态的细胞后的注意事项:
1、收到细胞后,在操作时用75酒精将培养瓶外面擦洗消毒。
2、收到细胞后,瓶中老培液和培养瓶均不能重复使用,全部换用新的培液,将细胞移至新的培养瓶。
3、通常供应细胞方的培液不会加任何抗菌素,在收到细胞后进行换液或传代时,视情况在培液中加双抗(100μ/ml青霉素,100μg/ml链霉素)。
4、对一些贴壁不牢地细胞,可重新吹打,离心(1000rpm/min,3分钟),接种。
5、在没拿到细胞前,先了解清楚细胞特性,培养方法等细节,不要等到细胞到了手忙脚乱的。
6、ATCC已经修改了大部分细胞的储存条件,用原来可以存放液氮液体环境,改成了建议储存液氮气相环境。