菌群移植模型实验技术-菌群移植模型的建立

菌群移植模型的建立，是因为无菌小鼠微生物背景非常消晰、干净，没有任何微生物干扰研究，已成为菌群与宿主关系研究不可替代的研究工具。

材料与仪器

器材：

粪便收集器、混匀仪等。

试剂：

①志愿者新鲜粪便;

②预还原磷酸盐缓冲液（(0.1 mol/L, pH 7.2）。

步骤

菌群移植模型的建立的基本过程可分为如下几步：

A. 收集供体粪便用于粪便悬液制备。根据 Perrin-Guyomard A. 等所描述的条件选择健康志愿者：出生后未服用过抗生素及微生态制剂，从未患腹泻及其他肠道疾病。

B. 收集志愿者清晨第一次排出的新鲜粪便，在厌氧、无菌条件下称量，以1:9（质量体积比）的比例加入预还原磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L, pH 7.2） 稀释液，振荡混匀即获得粪便悬液，立即接种无菌小鼠。用于分子微生态检测的粪便装入离心管，-80 °C保存备用。

C. 特定疾病患者的样品收集、预处理方式可参照健康志愿者。

D. 接种的方法除灌胃外，还可以采取灌肠法或皮肤涂抹法。

注意事项

菌群移植模型建立后，必须严格按照无菌条件进行动物饲养，并遵循不同菌群结构动物饲养于不同隔离器的原则，同时往往需要检测其菌群结构、验证定植效果。