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生物化学

心血管系统组织学分析实验-Masson 三色染色法检测心肌纤维化

2024-12-22 生物化学 加入收藏
简介心肌长期慢性损伤会引起心内膜和心内膜下心肌的纤维化,在 Masson 三色染色下,正常心肌呈红色,纤维化的心肌细胞呈蓝色,因此可以明确地区分和分析心肌纤维化

简介

心肌长期慢性损伤会引起心内膜和心内膜下心肌的纤维化,在 Masson 三色染色下,正常心肌呈红色,纤维化的心肌细胞呈蓝色,因此可以明确地区分和分析心肌纤维化的程度。

原理

Masson 三色染色法检测心肌纤维化的基本原理是心肌长期慢性损伤会引起心内膜和心内膜下心肌的纤维化,在 Masson 三色染色下,正常心肌呈红色,纤维化的心肌细胞呈蓝色。

材料与仪器

器材:染缸、心脏石蜡切片等。

试剂:

① Masson 三色染色试剂盒(福州迈新)

② 1% 冰醋酸

③ 苏木素(同 H-E 染色用)

④ 梯度乙醇

⑤ 二甲苯

⑥ 中性树脂

步骤

1、完成的心脏石蜡切片常规脱蜡复水:二甲苯 Ⅰ 5 min,二甲苯 Ⅱ 5 min,二甲苯 Ⅲ 5 min,无水乙醇 1 min,95% 乙醇 1 min,75% 乙醇 1 min,自来水冲洗数秒。苏木素染色 5 分钟或酌情。

2、Weiger 氏铁苏木素染 5~10 分钟。流水稍洗。

3、1% 盐酸酒精分化。流水冲洗数分钟。

4、丽春红酸性品红液染 5~10 分钟。蒸馏水稍冲洗。

5、1% 磷钼酸水溶液处理约 5 分钟。

6、不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染 5 分钟。

7、1% 冰醋酸处理 1 分钟。

8、95% 酒精脱水多次。

9、无水酒精脱水, 二甲苯透明,中性树胶封固。

注意事项

切片脱蜡应尽量干净。


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