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维生素 D 缺乏动物模型的建立

2024-12-23 动植物 加入收藏
简介通过减少维生素 D 摄入和皮肤合成的维生素 D,建立维生素 D 缺乏动物模型。用于建立维生素 D 缺乏动物模型比较多,如大鼠、小鼠、鸡、猪、猴等,其中以 W

简介

通过减少维生素 D 摄入和皮肤合成的维生素 D,建立维生素 D 缺乏动物模型。用于建立维生素 D 缺乏动物模型比较多,如大鼠、小鼠、鸡、猪、猴等,其中以 Wistar 大鼠、BALB/c 小鼠较常用。

原理

通过减少维生素 D 摄入,从而建立维生素 D 缺乏动物模型

用途

主要用于维生素 D 缺乏及其相关的各种疾病研究。

材料与仪器

试剂:

①玉米粉 76%;

②麦麸 20%;

③碳酸钙 3%;

④含碘盐 1%;

⑤赖氨酸 0.59%;

⑥B 族维生素。

步骤

维生素 D 缺乏动物模型建立的造模根据鼠类型分如下步骤:

(一)Wistar 大鼠模型

A、选用 21 日龄断奶的 Wistar 幼鼠,雌雄各半,喂饲缺乏维生素 D 饲料。避光饲养,用不锈钢塑料笼单笼喂养 30 天。

B、通过测定大鼠血生化变化和 X 线表现证实造模成功。

C、血清碱性磷酸酶 (AKP) 增高,血钙和血磷降低,骨 X 线片显示早期钙化带模糊,骨质软化,骨骼明显细小,骨密度降低,骨小梁变细、模糊、骨皮质变薄。骨组织光镜下,肥大软骨细胞层增加,细胞柱扭曲,软骨岛突向干侧呈灶性分布,使骨化线不规则。

(二)BALB/c 小鼠模型

A、选用怀孕 2 周的 BALB/c 小鼠,喂饲缺乏维生素 D 饲料、自由饮水,单笼饲养。

B、将鼠笼放入超净工作台,工作台四周内部用门板遮盖,外部用不透光布帘遮盖,12 小时通风一次,用不含紫外线黄光灯白天 12 小时照射,夜间熄灯。

C、孕鼠 6 天左右产子鼠,子鼠出生 3 周断奶,饲养环境同母鼠。测量 4-10 周、12 周小鼠体重,6 周时开始出现活动量下降,并且贴地行走。

D、12 周时处死小鼠。剪尾取血,测定血清维生素 D 水平明显下降,即造模成功。

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