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一步法制备感受态细胞
一、操作步骤：1. 涂平板：为取得最佳的感受态效率，必须先把甘油菌或其它形式保存的菌种涂LB平板，并培养过夜。2. 接种：取一有新鲜培养的菌种的LB平板，后续操
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腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞
摘要： 本实验从新生SD大鼠海马组织中分离神经干细胞，并通过观察携带EGFP基因的腺病毒（Ad/ EGFP）转染NSCS后EGFP表达规律及转染对NSCS的活力
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用氯化钙制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
下面的简单方案是Clhen等（1972）所用方法的变通方案，常用于成批制备感受态细菌，这些细菌可使每微克螺旋质粒ＤＮＡ产生 5x106-2x107个转化菌落，这
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重组质粒的筛选与鉴定
摘要： 可以在蛋白质水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子。可以在 蛋白质 水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子.基因水平的鉴定有酶切鉴定、 PCR
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感受态细胞的制备
摘要： coli TG1单菌落,接种于5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,取50ul培养液转入5ml LB中,37℃振荡培养1~1.5小时至
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瞬时转染分析法
摘要： 介绍5种瞬时转染分析法：瞬时转染分析法、稳定转染分析法、体外转录分析法、转基因分析法和同源重组分析法.1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究
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DNA的转化
实验原理：体外通过基因工程手段所构建的含目的基因的重组质粒，选用转化和筛选技术， 可获得含重组的阳性克隆。在此阳性克隆中，DNA可在生物体系中大量扩增，繁殖，
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转化的要点及疑难解析
1、 存放：超级感受态细胞必须从干冰运送包装箱取出直接放入–80C冰箱的底部。一定不要用液氮来存感受态细胞。1) 存放条件：超级感受态细胞对微小的温度改变也极度
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基因转染实验(磷酸钙－DNA共沉淀法)
核酸以磷酸钙－DNA共沉淀物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA仅有1%~5 %
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质粒的酵母直接转化
试验试剂：PLATE溶液： iZN ；40％聚乙二醇（PEG，分子量3350；Sigma P 3640）；0.1mol/L 醋酸锂 g；10 mmol/L Tr
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用CaCl2处理制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
1. 从37℃培养16~20 h 的新鲜平板中挑取一个单菌落（如大肠杆菌DH52），或1 ml 新鲜的16~20 h过夜培养物，转到一个含有100ml LB培养
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真核转染
一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅
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感受态细胞制备/转化
摘要： 人工构建的质粒缺乏转移必需的基因,不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移.这时就需要诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外DNA.质粒制备的必要
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基因转染技术介绍
常用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法，基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内，并在细胞内表达。转染方法有多种，根据不
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Cos-1细胞暂时转染
Note: This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection
