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感受态细胞的制备
摘要： coli TG1单菌落,接种于5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,取50ul培养液转入5ml LB中,37℃振荡培养1~1.5小时至
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瞬时转染分析法
摘要： 介绍5种瞬时转染分析法：瞬时转染分析法、稳定转染分析法、体外转录分析法、转基因分析法和同源重组分析法.1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究
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DNA的转化
实验原理：体外通过基因工程手段所构建的含目的基因的重组质粒，选用转化和筛选技术， 可获得含重组的阳性克隆。在此阳性克隆中，DNA可在生物体系中大量扩增，繁殖，
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转化的要点及疑难解析
1、 存放：超级感受态细胞必须从干冰运送包装箱取出直接放入–80C冰箱的底部。一定不要用液氮来存感受态细胞。1) 存放条件：超级感受态细胞对微小的温度改变也极度
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基因转染实验(磷酸钙－DNA共沉淀法)
核酸以磷酸钙－DNA共沉淀物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA仅有1%~5 %
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质粒的酵母直接转化
试验试剂：PLATE溶液： iZN ；40％聚乙二醇（PEG，分子量3350；Sigma P 3640）；0.1mol/L 醋酸锂 g；10 mmol/L Tr
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用CaCl2处理制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞
1. 从37℃培养16~20 h 的新鲜平板中挑取一个单菌落（如大肠杆菌DH52），或1 ml 新鲜的16~20 h过夜培养物，转到一个含有100ml LB培养
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真核转染
一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅
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感受态细胞制备/转化
摘要： 人工构建的质粒缺乏转移必需的基因,不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移.这时就需要诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外DNA.质粒制备的必要
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基因转染技术介绍
常用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法，基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内，并在细胞内表达。转染方法有多种，根据不
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Cos-1细胞暂时转染
Note: This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection
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酵母的高效转化
摘要： 酵母高效转化的实验方法.1、接种5ml液体YPAD或10ml SC,30℃下 振荡 培养过夜.2、计数过夜培养物细胞密度,以最终5106个/ml的细胞密
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高效感受态细胞制备
方法一：效率非常高，一般可到10*8，好时可到10*9，特别适宜于大片段与文库构建及珍贵材料的连接转化。实验试剂：A液：1M，MnCl2B液：1M，HEPES，
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一种高效的胚胎干细胞转染方法
文章作者介绍了一种基于脂质体的高效siRNA转染方法。利用该protocol，可以在CCE细胞达到98%的转染效率，在D3细胞达到80%的转染效率，并且对干细胞
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用体内电穿孔术对哺乳动物骨骼肌细胞进行DNA转染
详细描述了进行成年小鼠趾短屈肌和骨间肌纤维DNA转染时的体内电穿孔术。要想有较高的转染效率，必须严格按照要求的步骤进行。 0:00 用体内电穿孔术进行哺乳动物骨
