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感受态细胞制备实验
一、CaCl2 感受态细胞的制备的实验步骤1.前夜接种受体菌( DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜(约16小时);2.取 1m
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酿酒酵母感受态细胞的制备、转化
酿酒酵母感受态细胞的制备(1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基,30℃,250 rpm 培养过夜。(2)测定
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感受态细胞转化操作流程及提高转化效率的建议
摘要: 下文是感受态细胞转化操作流程及提高转化效率的建议.1、在冰上预冷2支14-ml BD Falcon聚丙烯圆底 离心管 .1支用来转化样品,1支做pUC1
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感受态细胞的制备及溶液配制
1. 挑取适当菌株的 E.coli 单菌落接种于 2mlSOB 培养液中,37℃摇床过夜。2. 取 0.5-1ml 过夜培养的菌液 转种到 50ml SOB 中
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大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法
常态的细胞不能摄入外部溶液中的DNA,所以要转化质粒DNA进入大肠杆菌必须首先制备感受态的大肠杆菌细胞。受体细胞经过一些特殊方法(如:CaCl,RuCl等化学试
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高效率感受态细胞的制备注意要点
大肠杆菌的感受态制备及转化关于大肠杆菌的感受态制备及转化的方法很多,最复杂的莫过于电转化,而最简单的则是将LB平板上的菌落直接挑入装有缓冲液的EP管冰箱即开始转
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氯化钙法进行质粒转化
利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形。仪器用具:37℃培养箱;42℃水浴;冰浴实验步骤:0.1 M CaCl2置冰
氯化钙法 质粒转化 -
脂质体转染的几个实验方法
摘要: 本实验介绍了脂质体转染的几个方法。实验原理脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁
脂质体转染 -
关于细胞转染 你知道多少?
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可分为瞬时转染,稳定转染等瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细
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转染实验的注意事项
将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:1.磷酸钙共沉淀将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包
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细胞瞬时转染
原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基
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大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法
摘要: 本文主要介绍了大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法.第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的 培养基 上,
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重组质粒的转化、筛选和鉴定操作
摘要: 学习克隆工作中最常用的双酶切,将外源基因与质粒连接方法及操作技术.一、实验目的:1、学习克隆工作中最常用的双酶切;2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作
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瞬时转染分析研究的步骤
1.瞬时转染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究转录调控,最常用的方法是瞬时转染分析法。该方法是通过一定的转染程序将含目的调控区的质粒导人培养细胞。在典型情况
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转染细胞的稳定筛选
1.确定抗生素作用的最佳浓度: 不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。① 提前 24 小时在 9