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免疫荧光常见问题总结
1、问:免疫荧光:用免疫荧光方法做同样的内容,组织切片和培养细胞,两者操作过程中有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同,细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染
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McAb的制备方法
1、体外培养 在细胞培养过程中杂交瘤细胞能产生和分泌McAb,但是一般产生的抗体量很少,约10~100μg/ml。近年来发展了各种新型培养技术和装置,包括用无血
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实验动物免疫方案
1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)动物 抗原量
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细菌数量的测定方法
1、计数器测定法: 即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)
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免疫细胞化学图像分析常用的测量参数
1、灰度 灰度(grey level)指图像各种分颜色的深浅程度。比较高级的图像分析仪可将灰度分成为256级,也有的只能将灰度分成64级,总之都是2n ,24
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单克隆抗体制备详述
1、动物免疫(1) 抗原制备制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是
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流式细胞周期检问答
1、Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温
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流式细胞凋亡检测问答
1、Q:rh Annexin V R-PE 20 tests是BD公司用于凋亡流式检测的试剂盒,产品显示种属为人,请问能否用于大鼠细胞的检测?A:可以。因为An
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用sephadex G-25脱盐,如何选择缓冲液
1) 如果我用sephadex G-25脱盐,如何选择缓冲液?因为我认为,如果选择含盐的缓冲液,本身带入了盐,能起到脱盐的效果吗?如果选择含盐的缓冲液,缓冲液里
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从免疫亲和层析柱上洗脱抗原方法
【准备工作】 此步骤最大的难点是确定恰当的洗脱条件。为了获得一个清晰的洗脱峰和较纯的抗原,需要花费大量的时间进行试验和调整洗脱条件。 【溶液和特别设备】 (1)
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荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含
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抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体
【摘要】目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F(ab)2片段表达载体,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达,比较二者的活性差异。方法 从相应的杂交瘤中
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微型双功能抗体抗CD3/抗Pgp的构建和表达
【摘要】目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD2
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免疫金银染色法(immunogold-silver taining,IGSS)
【基本原理】免疫金银染色法是利用银显影液,胶体金颗粒起着液化作用,使显影液中的银离子在还原剂(对苯二酚)存在情况下被还原成银原子,在金颗粒周围形成一个“银壳”,
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酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)
【基本原理】碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连