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单克隆抗体技术:细胞融合
（一）融合剂 细胞融合的方法有物理法，如电融合、激光融合，化学融合法和生物融合法，如仙台病毒，此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），
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酶 标记 抗体
(一) 酶制剂及其底物 凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶，原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求：(1)来源方便，易于纯化；(2)比活性高
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淋巴细胞检测和狼疮细胞试验
（一）淋巴细胞检测 虽然自身免疫病多与自身抗体有关，但仍有部分疾病不存在相关的自身抗体，而与致敏淋巴细胞有关，还可能与免疫调节异常或其他因素有关。这些相关因
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抗Ig抗体的制备
（一）抗原制备 Ig是免疫球蛋白，对异种动物而言，是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗Ig血清，经适当提取后，产生抗Ig抗体，又叫第二抗体或抗抗体。在多数的
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制备单克隆抗体的基本技术
（一）抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取110 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并
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抗体检测及杂交瘤细胞的选择
（一）抗体检测 用检测抗体的方法从杂交细胞中筛选出生产指定抗体的杂交株是很重要的。检测抗体的方法很多，从沉淀反应到放射免疫测定。由于 细胞培养 液中的抗体浓度通
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动物的选择与免疫
（一）动物的选择 目前应用最广的是小白鼠和大白鼠，尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用最广，因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱导出
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H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法
（一）材料及试剂1．培养基 RPMI-1640或TC199培养液2．PHA 同形态学方法3．小牛血清4．3H-TdR 选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子
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牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验
（一）材料及试剂 1．器材 ⑴细胞培养板：灭菌的国产96孔或40孔平底聚苯乙烯塑料板或进口96孔 细胞培养 板。 ⑵50μl、100μl、300μl微量加样器，
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猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联血清的制备
（一）材料及 试剂 1．猪瘟疫苗 2．猪丹毒菌苗 3．猪肺疫疫苗 4．肥猪 （二）操作方法 1．基础免疫 选健康的育肥猪数头，进行猪瘟、猪丹毒和猪肺疫三种疫苗的
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抗人血清抗体的制备
（一）材料： 1．动物：家兔 2．人血清 3．羊毛脂、石蜡油、卡介苗 4．其它：无菌生理盐水，无菌研钵等 （二）方法： 1．弗氏 佐剂 的制备 将羊毛脂与石蜡油
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红细胞抗体（溶血素）的制备
（一）材料： 1．动物：家兔 2．红细胞悬液 3．其它：无菌生理盐水，保存液（阿氏液）等 （二）免疫方法： 1．选择2-3千克健康雄兔，按如下剂量及程序免疫。日
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直接凝集反应（direct agglutination）
（一）玻片凝集试验 玻片凝集试验为定性试验方法，一般用已知抗体作为诊断血清、与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼观察凝
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杂交瘤细胞的保存方法
（一）保存 当获得产生所需的单克隆抗体的杂交瘤细胞后，必须将一部分杂交瘤细胞保存，否则在连续传代的过程中，可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗
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荧光素标记抗体的方法
（一）FITC标记抗体的方法 1．Marsshall 氏法 （1）材料：抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、
