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NK细胞活性测定:同位素法
一、原理将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时,靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来,其释放的量与NK细胞活性成正比。通过
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NK细胞活性测定:LDH法
一、原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成N
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迟发型变态反应(DTH)检测:耳肿胀法
一、原理二硝基氟苯(DNFB)是一种半抗原,将其稀释液涂抹腹壁皮肤后,与皮肤蛋白结合成完全抗原,由此刺激T淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞。4~7天后再将其涂抹于耳部
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细胞增殖检测:3H-TdR渗入法实例
一、原理T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗C
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流式荧光法检测多肿瘤标志物的方法学评价
一、仪器和试剂Luminex200流式荧光检测仪(美国Luminex公司);流式荧光多肿瘤标志物联合检测试剂(上海透景生命科技有限公司); E170电化学发光分
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Western-Blot实验的总结
一、样品制备1. 变性条件——SDS LB直接裂解用常温或者高温预热过(预热更有利于阻止蛋白水解或者磷酸酶去磷酸化,但容易遗忘,LB久煮某些性质会改变)的1*S
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细胞增殖检测方法:总论
一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前
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细胞凋亡的检测方法
一、形态学检测(一)光学显微镜和倒置显微镜 1、未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆
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靶细胞杀伤实验:LDH法
一、效应细胞的制备激惹5天后,于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结,100目钢网研磨,调整细胞浓度为2107.ml-1。台盼蓝色要求存活率>95%。二、
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利用流式细胞术分析细胞周期时相
一、实验目的掌握流式细胞仪的工作原理掌握用流式细胞仪测量细胞群体DNA含量分布的方法了解流式细胞术在细胞生物学研究中的应用二、实验原理流式细胞仪的工作原理是将待
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MACS磁珠系统(附BD IMag介绍)
一、免疫磁珠法分离细胞原理免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,无该
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磁性微球在生物学和医学的应用
一、免疫磁性微球在自身骨髓移植中的应用在过去10多年中,高剂量化疗后给予自身骨髓移植(ABMT)已经成为某些患有急性白血病、何杰金氏淋巴瘤(NHL)、神经母细胞
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流式细胞术:标本处理
一、流式细胞术常规检测时的样品制备1、直接免疫荧光标记法取一定量细胞(约1X106细胞/ml),在每一管中分别加入50μl的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分
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流式细胞仪的使用流程
一、开机程序1、检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。2、 打开储液箱,倒掉废液, 并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4
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细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
一、简介随着研究的进展,仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测